Яка концентрація суміші dNTP?

admin | 4 Квітня, 2025


dNTP Mix – розчин, що містить натрієві солі dATP, dCTP, dGTP

dGTP

Дезоксигуанозинтрифосфат (dGTP) є нуклеозидтрифосфат і нуклеотидний попередник, який використовується в клітинах для синтезу ДНК. Речовина використовується в техніці полімеразної ланцюгової реакції, секвенуванні та клонуванні.

https://en.wikipedia.org › wiki › Дезоксигуанозинтрифосфат

і dTTP

dTTP

Тимідинтрифосфат (ТТФ), також званий дезокситимідину трифосфат (dTTP), є одним із чотирьох нуклеозидтрифосфатів, які використовуються в синтезі ДНК in vivo. На відміну від інших дезоксирибонуклеозидтрифосфатів, тимідинтрифосфат не завжди містить у своїй назві префікс «дезокси».

https://en.wikipedia.org › wiki › Thymidine_triphosphate

, кожен по 10 мМ у воді при рН 7,5; загальна концентрація нуклеотидів становить 40 мМ. Один мікролітр суміші dNTP у 50 мкл реакції дасть кінцеву концентрацію dNTP 200 мкМ для кожного dNTP.

Типова концентрація для кожного з чотирьох dNTP є між 40 мкМ і 200 мкМ. Точна концентрація для експерименту залежатиме від типу експерименту, який проводиться.

Дезоксинуклеотидтрифосфат відноситься до чотирьох нуклеотидів (dATP, dGTP, dTTP і dCTP), які беруть участь у синтезі ДНК в організмах. Під час реплікації нуклеотиди додаються до розпакованої ДНК для утворення нових комплементарних ланцюгів.

Рекомендована кінцева концентрація для кожного dNTP 0,2–0,25 мМ. Вища концентрація (до 0,4 мМ) підвищує врожайність.

Рекомендований діапазон концентрації праймерів ПЛР 0,1-1 мкМ. Надмірна концентрація праймерів збільшує ймовірність неправильного праймування та генерації неспецифічних продуктів ПЛР. Для вироджених праймерів і праймерів, які використовуються для тривалої ПЛР, ми рекомендуємо вищі концентрації праймерів у діапазоні 0,3-1 мкМ.

Для дезоксинуклеозидстрифосфату (dNTP) концентрація в клітинах, що діляться, становить: dATP, 24±22; dGTP, 5,2±4,5; dCTP, 29±19 і dTTP 37±30. Для порівняння, dUTP зазвичай становить близько 0,2 мкМ.