Три етапи ПЛР─денатурація, відпал і розширення─ як показано в першому циклі, і експоненціальна ампліфікація цільової ДНК з повторним циклом.

Отже, послідовність кроків така денатурація, відпал і розширення.

Стандартна установка полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) складається з чотирьох етапів:

1. Додайте необхідні реагенти або майстер-мікс і шаблон до пробірок для ПЛР.
2. Перемішати і центрифугувати. …
3. Підсилюйте відповідно до параметрів термоциклера та праймера.
4. Оцініть ампліфіковану ДНК за допомогою електрофорезу в агарозному гелі з наступним фарбуванням бромістим етидієм.

Для ефективної ПЛР кінцевої точки зі швидкими та надійними результатами ось п’ять ключових кроків, які слід враховувати:

• Крок 1 Виділення ДНК.
• Крок 2 Дизайн грунтовки.
• Крок 3 Вибір ферменту.
• Крок 4 Термічний цикл.
• Крок 5 Аналіз ампліконів.

Q-чат

• денатурація. для розкручування цільової ДНК на дві окремі нитки потрібна температура 94-96 C.
• відпал. зв'язування праймерів з оцДНК; вимагає охолодження реакції і зниження температури до 50-70 С.
• розширення. …
• ПЛР один цикл. …
• автоматизований термоциклер. …
• амплікон. …
• негативний контроль. …
• позитивний контроль.

Полімеразна ланцюгова реакція — це процедура тестування ампліфікації нуклеїнової кислоти, яка складається з денатурація, ренатурація, подовження та посилення короткий сегмент ДНК або РНК. Це реалізується шляхом включення полімерази ДНК I, яка походить від Thermus aquaticus, також відомої як полімераза Taq.