Основні кроки для субклонування Ви вивільняєте та очищаєте свою вставку з батьківського вектора, лігуєте цю вставку в готовий цільовий вектор, перетворюєте цю реакцію лігування в компетентні бактеріальні клітини. Потім ви екрануєте трансформовані комірки для вставки.

У стандартних експериментах молекулярного клонування клонування будь-якого фрагмента ДНК по суті включає сім етапів: (1) Вибір організму-господаря та вектора для клонування, (2) Підготовка векторної ДНК, (3) Підготовка ДНК для клонування, (4) Створення рекомбінантної ДНК, (5) Введення рекомбінантної ДНК в організм господаря, (6) …

Основний процес клонування складається з чотирьох кроків:

• Виділення цільових фрагментів ДНК (часто їх називають вставками)
• Лігування вставок у відповідний вектор для клонування, створюючи рекомбінантні молекули (наприклад, плазміди)
• Трансформація рекомбінантних плазмід у бактерії або іншого відповідного господаря для розмноження.

У класичних протоколах розщеплення ферментом рестрикції та клонування з лігуванням клонування будь-якого фрагмента ДНК включає чотири етапи:

1. виділення цікавої ДНК (або цільової ДНК),
2. перев'язка,
3. трансфекція (або трансформація) і.
4. процедура скринінгу/відбору.

Які 7 кроків клонування ДНК?

1. Крок 1: Виділення ДНК. …
2. Крок 2: Вирізання ДНК. …
3. Крок 3: Підготовка вектора. …
4. Крок 4: Лігування. …
5. Крок 5: Трансформація. …
6. Крок 6: Відбір і відбір. …
7. Крок 7: Збір і аналіз. …
8. Розкриття потенціалу клонування ДНК.

Клонування

• Клонування генів, яке створює копії генів або сегментів ДНК.
• Репродуктивне клонування, яке створює копії цілих тварин.
• Терапевтичне клонування, яке створює ембріональні стовбурові клітини. Дослідники сподіваються використовувати ці клітини для вирощування здорових тканин, щоб замінити пошкоджені або хворі тканини в організмі людини.